論文開題：植物抗寒、低木質(zhì)素雙向表達載體的構(gòu)建

大學本科畢業(yè)論文(設計)開題報告
學院：化工學院 專業(yè)班級：生物技術

課題名稱 植物抗寒、低木質(zhì)素雙向表達載體的構(gòu)建

1、本課題的的研究目的和意義：
多基因轉(zhuǎn)化技術是現(xiàn)在生物技術的一個重要研究方向，雙向啟動子技術為多個基因同時調(diào)控植物成為一個可能。本項目利用雙向啟動子載體，構(gòu)建抗寒基因SOD和調(diào)控木質(zhì)素基因4CL1的融合基因，轉(zhuǎn)化桉樹植株，在調(diào)控的木質(zhì)素含量的同時，增強桉樹的抗寒性，為桉樹轉(zhuǎn)基因研
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的啟動子數(shù)目，更不必擔心引入生物體內(nèi)的啟動子之間序列同源而導致的轉(zhuǎn)基因_現(xiàn)象的發(fā)生。 目前，利用雙向啟動子進行轉(zhuǎn)基因研究的例子并不多，并且多數(shù)為人工構(gòu)建的雙向啟動子。利用天然雙向啟動子進行轉(zhuǎn)基因研究的重點仍然放在雙向啟動子的克隆與功能分析上。無論怎樣，雙向啟動子的應用為解決轉(zhuǎn)基因技術難題提供了可能，在基因工程研究和應用領域具有不可估量的作用，正成為轉(zhuǎn)基因技術研究的新領域。
3、 本課題的主要研究內(nèi)容（提綱）和成果形式：
借助北京林業(yè)大學蔣湘寧教授實驗室的高效雙向啟動子載體CaMV35S-mini35S載體，將高效表達的SOD基因和阻斷木質(zhì)素合成的反義4CL1基因構(gòu)建到這個載體上，轉(zhuǎn)化桉樹植株，獲得同時具有抗寒性和低木質(zhì)素優(yōu)點的雙轉(zhuǎn)基因桉樹。
成果形式





4、擬解決的關鍵問題：
高效表達的SOD基因和阻斷木質(zhì)素合成的反義4CL1基因構(gòu)與載體的連接
5、研究思路、方法和步驟：
一、克隆4CL1反義基因并與雙向啟動子載體連接
1)堿裂解法提取CHFA1質(zhì)粒
2)4CL1反義基因擴增
3)4CL1 PCR純化產(chǎn)物與pMD18-T載體連接
4)pBDGG和pFA1的雙酶切與連接
二、克隆SOD基因及與pBDFA1連接
1)SOD基因擴增
2)PCR純化產(chǎn)物與pMD18-T載體連接
3)雙酶切與連接
6、本課題的進度安排：
2011.11.1-2011.12.1 反義4CL1基因和SOD基因的克隆載體構(gòu)建
2011.12.2-2012.1.1 反義4CL1基因片段與雙向載體pBDGR的酶切連接及陽性克隆子的驗證
2012.1.2-2012.2.2 SOD基因片段與前面的陽性克隆子載體的酶切連接及陽性克隆子的驗證
7、參考文獻：
[ 1 ] 劉石娟, 鄭成超. 真核生物雙向啟動子的結(jié)構(gòu)與功能[J]. 中國生物化學與分子生物學報 , 2011,(10)
[ 2 ] 賴鵬程. 高等植物特異啟 ……（未完，全文共1701字，當前僅顯示1081字，請閱讀下面提示信息。收藏《論文開題：植物抗寒、低木質(zhì)素雙向表達載體的構(gòu)建》）