酪氨酸酶及其抗體與自身免疫性白癜風

　　摘要:酪氨酸酶是黑素合成的關鍵酶，可能是白癜風自身免疫的重要抗原。最近發(fā)現(xiàn)部分白癜風患者血清中有酪氨酸酶抗體，且與白癜風臨床類型和分期密切相關。提示自身免疫性白癜風發(fā)病機制與酪氨酸酶抗體水平有關，為其免疫治療提供依據(jù)。酪氨酸酶抗體可以作為白癜風活動性的一個指標。
　　酪氨酸酶（tyr）是一種75kd含銅酶，來源于胚胎神經峭細胞，是黑素代謝和兒茶酚胺的關鍵酶。spritz等 。白癜風患者血清中tyr抗體的生成，提示白癜風的發(fā)病與自身免疫有關。
　　一、酪氨酸酶的抗原性
　　酶是多種自身免疫紊亂性疾病的自身抗原 ，tyr作為抗原必需具備下列條件：①酶活躍性；②免疫原性；③能誘導識別自身的抗體。
　　tyr能暴露于免疫系統(tǒng)中，從惡性或正常色素細胞來源的tyr，可以作為自身抗體產物的靶抗原；tyr與蛋白酶等無交叉反應，提示抗tyr抗體對tyr是特異性的，mc能表達mhcⅱ類分子，可作為抗原遞呈細胞。人mmc能分泌tyr，tyr抗體在黑素瘤患者血清中發(fā)現(xiàn)，其它惡性腫瘤患者血清中則沒有，提示惡性黑素瘤可產生抗tyr的抗體 。
　　哺乳動物黑素生成由多個基因位點共同參與調控。不同位點基因及相關蛋白具有多種
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和cd4+t細胞均能產生有效的抗腫瘤應答。trp-1原位雜交證實編碼基因位于人第9號染色體q23區(qū)，為igg抗體識別抗原，具有dhi-2羧酸氧化酶活性，非突變型trp-1抗原可被hla-a31特異性ctl識別。外源性trp-1cdna在mmc等中表達。gp100即mc/mmc特異性蛋白p mel-17，免疫電鏡證實gp100主要位于ⅰ、ⅱ期黑素體膜，廣泛表達于人mmc（50％）。hla-a2 mmc的gp100可被自體腫瘤浸潤性淋巴細胞（til）識別。識別部位是十肽lldgtatlrl（aa457-486），從gp100提取的十肽能體外誘導til，將til細胞與il-2配伍應用于hla-a2+黑素瘤患者，可消除自發(fā)性黑素瘤的轉移灶。
　　二、酪氨酸酶抗體
　�。ㄒ唬z測方法：tyr抗體在白癜風患者血清中檢出。song等 。這種方法能敏感定量檢測抗體。
　�。ǘ┊a生、特點、特性：
　　1.抗tyr抗體的產生：用人tyr cdna轉染l細胞，獲得l-ty細胞，免疫同源性c3h鼠，即用5*106l-ty細胞與等量frend佐劑混合，腹膜內注入有6周鼠齡的雌性c3h鼠體內，每次間隔2周，第3，4次用5*106細胞裂解物與等量frend佐劑混合免疫動物。第4次注射后3天，抽血，分離血清，同時用未轉染l細胞去除非特異反應性成分，結果用人tyr cdna轉染l細胞免疫的8只c3h鼠中，4次免疫后，有4只對tyr cdna轉染l細胞的鼠血清抗體滴度＞10-4，c3h鼠免疫前及正常鼠對l-ty細胞無反應性。用l-ty細胞免疫動物獲得的血清能沉淀l-ty和有色素mmc細胞裂解物。免疫沉淀法可見分子量為70kd～80kd的寬幅條帶，可能為tyr生物合成中間代謝產物，未轉染l細胞，tyr陰性無色素mmc中未見特異性條帶。
　　2.免疫印跡法檢測tyr抗體：用抗tyr血清10-3稀釋度，在tyr轉染l細胞和有色素mmc可見細胞內顆粒染色，親代l細胞內無胞內染色，在l-ty細胞，細胞內染色顆粒位于核周和胞質內。無色素mmc，不表達tyr mrna，無tyr活性，與tyr抗體無相互作用。有色素mmc和培養(yǎng)mc，高度表達tyr活性，黑素形成多，細胞質顆粒深度染色。
　　單克隆抗體ta99能識別trp-1糖蛋白，ta99能與人有色素mmc表達的trp-1和轉染l-gp細（用編碼trp-1全長cdna轉染鼠l細胞獲得）表達的全長人trp-1cdna相互作用，且免疫耗竭實驗證實ta99不耗竭能產生分子量為70kd～80kd條帶的抗tyr血清，免疫熒光分析抗tyr抗體與trp-1，tyr l-gp細胞無相互作用，抗tyr抗體不沉淀來自l-gp細胞的trp-1。
　　3.tyr抗體使tyr活性喪失：免疫鼠血清能沉淀鼠mmc，l-ty細胞裂解物，提示免疫鼠血清能滅活有色素mmc及l(fā)-ty細胞tyr的活性，加入l-多巴底物后，見黑素形成，提示tyr活性恢復，免疫沉淀時如用免疫前血清則無黑素形成 。
　　三、白癜風
　　白癜風與tyr抗體：tyr抗體在白癜風中常常發(fā)生。song等 。
　　大多數(shù)急性白癜風及黑素瘤患者有對mc、mmc的抗體，這些抗體在體外通過補體介導細胞毒作用和抗體依賴細胞毒作用殺傷mc。cui等檢測發(fā)現(xiàn)30例黑素瘤患者血清有24例（80％）、29例白癜風患者血清有24例（83％）抗體陽性，而28例對照組只有2例（7％）陽性。人及動物黑素瘤中，白癜風的出現(xiàn)能改變其進程。用mmc免疫動物可誘發(fā)白癜風。重組抗mmc抗體對黑素瘤有效 。白癜風mc抗體既能溶解mc，致皮膚白斑形成，又能有效破壞mmc；mmc抗體也能與正常mc結合，誘導黑素瘤產生白癜風樣白斑，tyr抗體則是二者之間的橋梁。
　　白癜風患者血清mc抗體滴度與該病活動性和嚴重程度密切相關，50％局限性白癜風患者血清中有對mc的抗體，而彌漫性白癜風則高達93％，且彌漫性白癜風mc抗體能與mmc結合，抑制其增殖。在補體存在的情況下溶解細胞，減少體內鼠黑素瘤轉移，mmc上抗體表位滴度在白癜風較健康者及黑素瘤高。黑素體是黑素合成和貯存的亞細胞器，ando等 。
　　白癜風患者血清含有抗mc抗體，mc抗體在smyt ……（未完，全文共4497字，當前僅顯示2271字，請閱讀下面提示信息。收藏《酪氨酸酶及其抗體與自身免疫性白癜風》）