論文開題：閩南藥用植物菌根多樣性研究

大學(xué)本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))開題報(bào)告
學(xué)院：化工學(xué)院　　　　　　　　　　　　　專業(yè)班級(jí)：園藝（觀賞園藝）　
課題名稱 閩南藥用植物菌根多樣性研究

1、本課題的的研究目的和意義：
閩南藥用植物面臨掠奪式開采，致使其越來越少，有的種類瀕臨枯竭，亂施化肥、農(nóng)藥造成的質(zhì)量不穩(wěn)定、農(nóng)殘超標(biāo)，栽培措施不配套造成的產(chǎn)量、質(zhì)量下降等，嚴(yán)重威脅了其入藥的安全性、穩(wěn)定性、有效性。與其互利共生的AM真菌能幫助藥用植物吸收磷、鉀等營養(yǎng)元素及水分，對(duì)重金屬也有“解毒”功能及其他抗逆作用，使藥用植物獲得較好的增產(chǎn)并提高品質(zhì)。 本課題目的在于分析野生藥用植物叢植菌根多樣性，為叢植菌根真菌在藥用植物上的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。


2、文獻(xiàn)綜述（國內(nèi)外研究情況及其發(fā)展）：
由于全球生態(tài)環(huán)境日益惡化、生物多樣性減少、植被退化、資源枯竭等問題嚴(yán)重，世界發(fā)達(dá)國家都十分重視對(duì)AM真菌的資源保護(hù)和調(diào)查工作。我國近年來在該領(lǐng)域也開展了大量調(diào)查工作，而對(duì)于藥用植物AM真菌的研究報(bào)道較少。AM真菌廣泛分布于陸地生態(tài)系統(tǒng)中，能與絕大多數(shù)高等植物形成共生體系。大量研究證實(shí)，AM真菌能夠擴(kuò)大植物根系吸收面積，增強(qiáng)宿主植物對(duì)土壤養(yǎng)分和水分的吸收利用，提高植物抗病性和抗
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5、研究思路、方法和步驟：
一、菌根定植率的測(cè)定：AM真菌菌根的染色和定殖率按Phillips和Hayman(1970)方法測(cè)定。
采用KOH透明─乳酸甘油酸性品紅紫色法。具體作法：洗凈根系→把根剪成0.5～1cm根段約50段放入試管中→洗凈泥沙浸泡，5min→FAA溶液15mL，固定24h→加10%KOH（透明），10min→水浴90℃，20min→水洗3次→酸化加入2%HCl，5min→去掉酸液加入染色劑→水浴90℃，10min→乳酸分色→鏡檢測(cè)定，計(jì)算出AM定植率、叢枝著生率和單位根長泡囊數(shù)。
先挑選30個(gè)細(xì)小根段壓片，在顯微鏡下觀察菌根結(jié)構(gòu)并拍照，測(cè)定感染根段數(shù)（含有AM真菌菌絲、泡囊、叢枝、或孢子之一者視為感染根段）。
菌根定植率按照Abbot等的方法來統(tǒng)計(jì)， 即被侵染的根段數(shù)占鏡檢總根段數(shù)的百分比。按照如下公式計(jì)算菌根感染率：
菌根定植率(% )=有菌根感染的根段數(shù)／檢查根段總數(shù)*100%
根據(jù)AM真菌侵染分級(jí)計(jì)算對(duì)根樣侵染做出評(píng)估，估測(cè)整個(gè)樣品根系被AM 真菌侵染的營養(yǎng)根的數(shù)目，將評(píng)估等級(jí)分為5 個(gè)等級(jí)，0～5%為1級(jí)；6%～25%為2級(jí)；26%～50%為3級(jí)；51%～75%為4級(jí)；76%～100%為5級(jí)。
二、 AM真菌孢子的分離和鑒定
1、AM真菌孢子的分離：取土樣25g于大燒杯中加水?dāng)嚢琛o止30分多次搖勻土樣全部過篩→過篩40目/160目/325目，土粒沖洗干凈→160目和325目篩上物裝入離心管→3000rpm，3min→去掉上清液→加入60%蔗糖→攪勻→1500rpm，2min →上清液過325目篩→鏡檢。
2、真菌孢子的鑒定方法：在體視顯微鏡下觀察記錄孢子數(shù)量、顏色、大小、連孢菌絲特征、孢子果形態(tài)等，然后挑取孢子置于載玻片上，加不同浮載劑(水、Melzer‘s試劑、PVLG (聚乙烯醇-乳酸-甘油))進(jìn)行壓片，在生物顯微鏡下測(cè)量孢子的大小、厚度，觀察孢子的顏色、紋飾、類型等特征并進(jìn)行拍照。
三、土壤理化性質(zhì)的測(cè)定
將采回的土樣，放在木盤中或塑料布上，攤成薄薄的一層，置于室內(nèi)通風(fēng)陰干。風(fēng)干后的土樣，倒入鋼玻璃底的木盤上，用木棍研細(xì)，使之全部通過2mm孔徑的篩子。充分混勻后用四分法分成兩份，一份作為物理分析用，另一份作為化學(xué)分析用。作為化學(xué)分析用的土樣還必須進(jìn)一步研細(xì)，使之全部通過1mm或0.5mm孔徑的篩子。
土壤含水量、有機(jī)質(zhì)、堿解氮、速效磷、速效鉀、電導(dǎo)率、pH測(cè)定分別采用烘干法、重鉻酸鉀容量法、堿解擴(kuò)散法、NH4F-HCl法、硝酸溶液浸提−火焰光度法、電導(dǎo)率儀、pH儀。pH測(cè)定時(shí)的水土比為5∶1。
四、多樣性分析：參照張美慶等(1998)方法計(jì)算AM真菌豐富度(SR)、密度(SD)、頻度(F)、相對(duì)多度(RA)、Shannon-Wiener多樣性指數(shù)（H）和物質(zhì)均勻度（J）。孢子密度度( SD )指植物根際100 g土壤中所含的孢子數(shù)：公式為SD=所有孢子數(shù)/土壤總樣本數(shù)。
物種豐富度( SR )指植物根際100 g土壤中含有的AM真菌種的數(shù)目：
SR = AM 真菌總種數(shù)/土壤總樣本數(shù)。
頻度( F) 指出現(xiàn)頻率，指該種真菌的出現(xiàn)次數(shù)占所有物種出現(xiàn)次數(shù)之和：
F= (某屬或種的出現(xiàn)次數(shù)/土樣數(shù)) *100%
相對(duì)多度( RA)指種的個(gè)體數(shù)在群落總物種數(shù)中的比率：
RA= n(某屬或種的孢子數(shù)) /N (該地區(qū)AM 真菌孢子總數(shù)) *100%
重要值I = (F+RA)/2，即分離頻度和相對(duì)多度的平均值。將AM真菌優(yōu)勢(shì)度按重要值(I)劃分為4個(gè)等級(jí)，即I＞60%為優(yōu)勢(shì)屬(種)，40%＜I≤60%為最常見屬(種)，20%＜I≤40%為常見屬(種)，I≤20%為稀有屬(種)。
Shannon-Weiner物種多樣性指數(shù)(H)：假設(shè)有1個(gè)包含N 個(gè)體的隨機(jī)樣本，其種i的個(gè)體數(shù)為Ni ，則Pi = Ni/N.故H可用下式估計(jì)：

式中： k為某樣點(diǎn)中AM真菌的種數(shù)；Pi為該樣點(diǎn)AM真菌種i的孢子密度占該樣點(diǎn)總孢子密度的百分比。
物種均勻度J=H/lnS, H為Shannon-Weiner指數(shù)，S為采樣點(diǎn)AM真菌種數(shù)目。



式中： k為某樣點(diǎn)中AM真菌的種數(shù)；Pi為該樣點(diǎn)AM真菌種i的孢子密度占該樣點(diǎn)總孢子密度的 ……（未完，全文共4574字，當(dāng)前僅顯示2310字，請(qǐng)閱讀下面提示信息。收藏《論文開題：閩南藥用植物菌根多樣性研究》）