基因定量分析技術(shù)

　　基因定量分析技術(shù)的應(yīng)用價值
　　近年來基因定量分析的價值受到越來越多研究者的重視。過去由于過分強調(diào)了感染后過強的細(xì)胞免疫應(yīng)答介導(dǎo)肝細(xì)胞損傷，忽視了對病毒復(fù)制水平與致病性之間因果關(guān)系的研究。目前普遍認(rèn)為，盡管不直接破壞寄生細(xì)胞，但病毒的活躍復(fù)制是啟動或激發(fā)肝臟組織炎癥反應(yīng)的因素。這表明確定感染者體內(nèi)復(fù)制狀態(tài)，即從基因定量的角度作病情分析是十分有意義的。事實上，真正引起人們關(guān)注基因定量分析價值的重要原因是最近發(fā)現(xiàn)了干擾素治療與基因水平兩者之間有非常密切的關(guān)系。基因定量分析還在轉(zhuǎn)基因動物、基因治療、蛋白疫苗和核酸疫苗、抗藥物體外試驗和動物試驗及耐藥研究、流行病學(xué)研究、血液制品污染監(jiān)測等方面具有重要的應(yīng)用價值。
　　一、基因定量分析在干擾素治療中的應(yīng)用
　　尚無藥物可以清除所有感染者體內(nèi)顆粒。干擾素是目前唯一有一定
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治療；其次，干擾素治療期間，可根據(jù)基因水平的動態(tài)變化適時調(diào)整治療劑量，決定是否縮短或延長療程，及是否終止治療。這不僅對制訂合理的治療方案，也對減輕病人負(fù)擔(dān)，避免不恰當(dāng)用藥有指導(dǎo)意義。筆者認(rèn)為，目前國際上普遍采用的所謂“六個月療程”及某些中高劑量治療方案均缺乏充分和足夠的立論依據(jù)，有必要結(jié)合基因定量分析結(jié)果，重新評價和制訂干擾素治療計劃；最后，干擾素治療結(jié)束后，對有反應(yīng)者定期作定量分析，有助于發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)者，并根據(jù)血清含量波動情況決定是否實施再治療。有人報告，首次干擾素治療有效者，再治療的效果亦佳。如果第一次治療無反應(yīng)或反應(yīng)較差者，第二次干擾素治療仍不能取得理想療效。
　　二、基因定量分析的其他臨床價值
　　感染后，在臨床表現(xiàn)方面的差異非常明顯可以表現(xiàn)為無癥狀攜帶者、急性肝炎、慢性肝炎、暴發(fā)型肝炎、肝硬化及肝癌等多種疾病狀態(tài)。病毒在肝細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制水平與各種臨床疾病狀態(tài)之間可能存在著某些必然聯(lián)系。由于基因定量技術(shù)的發(fā)展和成熟，目前已有可能從某些現(xiàn)象上闡明復(fù)制與致病性之間的“量效”關(guān)系。
　�、濉盁o癥狀攜帶者”可能為活動性乙肝患者。有部分感染者，由于免疫耐受或其它原因，體內(nèi)呈復(fù)制不活躍的“潛伏”狀態(tài)，但并不意味著不存在進行性肝損害。等研究發(fā)現(xiàn)無癥狀攜帶者在其自然發(fā)展史上，復(fù)制處于波動狀態(tài)，時有加劇，病毒復(fù)制積累到一定程度后水平增加。一般規(guī)律是血清水平上升活性增加抗滴度提高。因此無癥狀攜帶者應(yīng)采取積極治療措施，否則這類人群不僅作為重要的病毒庫傳播，而且由于隱匿性肝細(xì)胞損傷的不斷積累，不經(jīng)過慢性肝炎階段，直接向肝硬化和肝癌發(fā)展。
　　㈡水平與感染者病情和預(yù)后的關(guān)系密切。上述無癥狀攜帶者是一個特殊_。而對那些急性和慢性乙型肝炎患者而言，水平對預(yù)后判斷有幫助。研究發(fā)現(xiàn)一直保持較高水平的急性肝炎患者易慢性化，而復(fù)制水平較高的慢性肝炎患者不僅對干擾素治療的反應(yīng)性差，而且肝組織炎癥反應(yīng)更明顯，病情更重，更易發(fā)生肝硬化和肝癌。目前在能否用血清水平來判斷肝組織炎癥損傷程度這類問題上尚有爭議。動物實驗表明，鴨肝被廣泛感染的同時，并不伴隨明顯病毒血癥肝細(xì)胞清除病毒的同時也無病毒血癥加重的證據(jù)。然而最近有人對感染者進行基因定量分析研究，發(fā)現(xiàn)水平與水平以及肝臟分級之間有密切關(guān)系。
　　㈢肝移植者定量的意義
　　等報告肝移植前患者血清水平的高低決定移植后肝臟是否再感染。作者觀察到，例移植前血清含量低于拷貝，移植后不間斷地采用免疫預(yù)防，隨訪個月，無一例再發(fā)肝炎，但另外兩例移植前病毒拷貝數(shù)大于則發(fā)生了嚴(yán)重再感染。建議移植前使用抗藥物，最大限度降低血清濃度，有助于防止侵犯移植后肝臟，提高肝臟移植的效果。
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　　前核基因突變可導(dǎo)致表達缺失。感染不表達的突變株，或野生型在體內(nèi)突變并成為優(yōu)勢株均產(chǎn)生較嚴(yán)重的后果，如易發(fā)生暴發(fā)性肝炎，預(yù)后差，干擾素治療無效等。目前已能采用核酸序列測定技術(shù)、技術(shù)、限制性片段長度多態(tài)性分析技術(shù)等來定性檢測前核基因突變。最近建立了一種及產(chǎn)物的顯 ……（未完，全文共2549字，當(dāng)前僅顯示1620字，請閱讀下面提示信息。收藏《基因定量分析技術(shù)》）