大學本科畢業(yè)論文(設計)開題報告
學院: 化工學院 專業(yè)班級: 08生物技術
課題名稱 姜黃素代謝調(diào)控基因克隆與功能分析
1、本課題的的研究目的和意義:
姜黃素是從姜科、天南星科中的一些植物的根莖中提取的一種化學成分,其中,姜黃約含3%~6%,是植物界很稀少的具有二酮的色素,為二酮類化合物。姜黃素為橙黃色結(jié)晶粉末,味稍苦。不溶于水。在食品生產(chǎn)中主要用于腸類制品、罐頭、醬鹵制品等產(chǎn)品的著色。醫(yī)學研究表明,姜黃素具有降血脂、抗腫瘤、抗炎、利膽、抗氧化等作用。而在姜黃素的代謝中苯丙氨酸解氨酶起了重要的作用。
苯丙氨酸解氨酶( Phenylalanne ammonial-lyase,PAL,E. C4. 3. 1. 5) 催化
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與mRNA的純化
2.CDNA的合成
3.克隆引物的設計
5、研究思路、方法和步驟:
苯丙氨酸解氨酶在姜黃葉片中表達量相對較高,采取提取姜黃葉片中總RNA的方法得到所需的苯丙氨酸解氨酶mRNA片段,采取RT-PCR的方法得到cDNA。
根據(jù)提取RNA的基本步驟,參考植物RNA提取方法進行試驗。
采用液氮研磨法,研磨姜黃葉片,采用RNA提取試劑盒提取RNA,純化后用于合成CDNA第一鏈。
采用生物信息學的方法進行姜黃PAL基因保守序列的預測,制取引物,PCR方法合成姜黃PAL基因片段。
6、本課題的進度安排:
2012年4月20日之前完成RNA的提取純化并合成CDNA第一鏈,保存。
2012年5月10日之前完成引物的設計。
2012年5月20日之前完成姜黃PAL基因片段的克隆。
7、參考文獻:
桂花苯丙氨酸解氨酶基因的克隆與序列分析——華北農(nóng)學報•2 0 1 0,2 5 ( 5 ) : 5 6 -6 0 張威威1,許鋒1,張芙蓉1,王燕1,程水源2
(長江大學園藝園林學院,湖北荊州434025; 2. 黃岡師范學院生命科學與工程學院,湖北黃州438000)
葡萄愈傷組織RNA提取方法比較及部分基因的表達差異初步分析——云南大學學報( 自然科學版) , 2009, 31 ( 4) : 410~415 代 茹1 , 冀 敏1 , 舒小梅1 , 陳尚武2 , 張 文1 , 馬會勤1
(1. 中國農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學與生物技術學院,北京 100193; 2. 中國農(nóng)業(yè)大學食品科學與營養(yǎng)工程學院,北京 100083)
大豆PAL2基因的克隆與分析 ——《大豆科學》 2010年01期
WANG Chan- chan, WANG An- na, WU Lei, LI Ye- cheng, LIU Cheng, MA Feng- ming
( College of Agriculture, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, Heilongjiang, China)
Characterization of phenylalanine ammonia-lyase (PAL) gene in wounded lettuce tissue——Patent Application Publication
Saltveit, Mikal E. (Davis, CA, US)
Campos, Reinaldo (Davis, CA, US)
Nonogaki, Hi ……(未完,全文共2333字,當前僅顯示1483字,請閱讀下面提示信息。
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