論文開題報(bào)告：蛋白核小球藻對(duì)氧氟沙星脅迫的響應(yīng)

大學(xué)本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))開題報(bào)告
學(xué)院：化工學(xué)院　　　　　　　　　　　　　專業(yè)班級(jí)：09環(huán)境工程

課題名稱 蛋白核小球藻對(duì)氧氟沙星脅迫的響應(yīng)

1、本課題的的研究目的和意義：
蛋白核小球藻是一種低等植物，屬于綠藻門、色球藻目、小球藻屬，是本屬植物中唯一具有蛋白核的種類。在小球藻的細(xì)胞內(nèi)含有豐富的葉綠素，有吸附并排除毒素的作用，可以排出體內(nèi)的有害物質(zhì)。實(shí)驗(yàn)證明小球藻有免疫調(diào)節(jié)作用，對(duì)大腸桿菌和病毒感染能起到抑制作用。氧氟沙星( oflo*acin，OFL*) 具有抗菌譜廣、抗菌活性強(qiáng)的特點(diǎn)，且與其它抗菌藥物無交叉耐藥性。本實(shí)驗(yàn)研究了不同濃度的氧氟沙星對(duì)小球藻的生長(zhǎng)狀況、酶活性的影響，以期探討氧氟沙星對(duì)蛋白核小球藻可能的毒性作用機(jī)制。
2、文獻(xiàn)綜述：
藻類植物一般位于食物鏈的最底端，作為水生生態(tài)系統(tǒng)的初級(jí)生產(chǎn)者，其種類的多樣性和初級(jí)生產(chǎn)量會(huì)直接影響水生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)功能，在水生生態(tài)系統(tǒng)中具有重要意義，因而成為監(jiān)測(cè)和評(píng)價(jià)水環(huán)境質(zhì)量的
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時(shí)間延長(zhǎng)，斜生柵藻對(duì)OFL* 逐漸產(chǎn)生一定的耐受能力，使藻細(xì)胞恢復(fù)逐漸加快。吳銀寶等[8]研究了另一種喹諾酮類抗生素———恩諾沙星對(duì)雨生紅球藻的毒性，這兩種抗生素的藻類毒性均隨時(shí)間延長(zhǎng)而減小，且氧氟沙星對(duì)藻類的毒性可能強(qiáng)于恩諾沙星，但毒性差異也可能是由藻種的差異所致。
目前許多學(xué)者認(rèn)為藻類中富含豐富的酯類和甘油，是制備生物柴油的良好原料，并對(duì)一些藻進(jìn)行了研究。Jin等人對(duì)小球藻進(jìn)行了研究，得出結(jié)論小球藻可作為生物柴油的原料[9-10]。小球藻可耐高濃度的CO2和高溫，可用于固定排放出來的CO2。小球藻屬和柵藻屬還可以去除培養(yǎng)基中多余的營(yíng)養(yǎng)物氮和磷，可用于治理污水[11-12],它們的提取物也可作為食品添加劑加入到甜點(diǎn)、面條等食物中[13]。由此可見，小球藻有重要的利用價(jià)值，因此本文選取了這種藻作為實(shí)驗(yàn)藻。
本實(shí)驗(yàn)選取目前被廣泛使用的抗生素——氧氟沙星，研究暴露于抗生素的蛋白核小球藻代謝的影響，以期為準(zhǔn)確評(píng)估氧氟沙星對(duì)藻類的毒性以及篩選有效的生物標(biāo)志物提供理論依據(jù)。

3、本課題的主要研究?jī)?nèi)容（提綱）和成果形式：
3.1 研究?jī)?nèi)容
通過向小球藻中添加不同濃度的OFL*，確定OFL*的半有效濃度，測(cè)定小球藻的生長(zhǎng)狀況以及某些酶的活性，試圖探討OFL*對(duì)蛋白核小球藻作用的機(jī)理。
3.1.1 關(guān)系曲線的繪制
根據(jù)血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)以及分光光度計(jì)測(cè)吸光度，得到水華微囊藻和吸光度之間的關(guān)系曲線。
3.1.2 確定OFL*的半有效濃度
通過分析不同濃度OFL*作用下的藻細(xì)胞密度-吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算藻細(xì)胞密度，進(jìn)而計(jì)算生長(zhǎng)抑制率，用概率單位-濃度對(duì)數(shù)法求出半數(shù)效應(yīng)濃度。
3.1.3 不同濃度的OFL* 對(duì)蛋白核小球藻生物量的影響
通過分析不同濃度OFL*作用下小球藻光密度值，探討OFL*對(duì)小球藻生長(zhǎng)的影響。
3.1.4 不同濃度的OFL*對(duì)蛋白核小球藻抗氧化系統(tǒng)的影響
通過分析不同濃度OFL*作用下小球藻的超氧化物歧化酶SOD、過氧化氫酶CAT和丙二醛的變化，來探討OFL*對(duì)小球藻抗氧化系統(tǒng)的影響。




3.2 成果形式
本課題研究的成果以數(shù)據(jù)、圖表以及機(jī)理分析的形式進(jìn)行表達(dá)，數(shù)據(jù)包括原始數(shù)據(jù)和計(jì)算分析獲得的數(shù)據(jù)，然后用圖表將關(guān)聯(lián)的數(shù)據(jù)形象地表示出來，以便于對(duì)整個(gè)研究過程進(jìn)行機(jī)理分析與討論。






4、擬解決的關(guān)鍵問題：

本項(xiàng)實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵問題是探索出具有抑制作用的OFL*的半數(shù)效應(yīng)濃度濃度，從而進(jìn)一步分析抑制作用的機(jī)制。


5、研究思路、方法和步驟：
（1）研究思路



（2）方法和步驟
A. 關(guān)系曲線的繪制
用血球計(jì)數(shù)板顯微計(jì)數(shù)法測(cè)定藻細(xì)胞密度，并于680nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度，從而得到蛋白核小球藻藻密度與OD680的關(guān)系曲線。
B. 確定OFL*的半有效濃度
將不同濃度的OFL*分別加入到小球藻中，其中包括一個(gè)空白對(duì)照組和幾個(gè)濃度組，每組設(shè)定三個(gè)平行，每天于24 h、48 h、72 h、96 h 取樣測(cè)定吸光度。通過藻細(xì)胞密度-吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算藻細(xì)胞密度，進(jìn)而計(jì)算生長(zhǎng)抑制率，用概率單位-濃度對(duì)數(shù)法求出半數(shù)效應(yīng)濃度。
C．不同濃度的OFL* 對(duì)小球藻生物量的影響
將不同濃度的OFL*分別加入到小球藻中，其中包括一個(gè)空白對(duì)照組和幾個(gè)濃度組，每組設(shè)定三個(gè)平行，每天取樣測(cè)定吸光度。細(xì)胞數(shù)的測(cè)定：同時(shí)取1 ml藻液用魯格氏液固定，取0.1 ml在顯微鏡下用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
D. 不同濃度的O ……（未完，全文共5525字，當(dāng)前僅顯示1940字，請(qǐng)閱讀下面提示信息。收藏《論文開題報(bào)告：蛋白核小球藻對(duì)氧氟沙星脅迫的響應(yīng)》）