您的位置:新文秘網(wǎng)>>畢業(yè)論文/文教論文/調(diào)研報(bào)告/>>正文

論文開(kāi)題:葉酸偶聯(lián)HTCC的合成及其基因載體初步研究

發(fā)表時(shí)間:2013/9/5 20:45:04


大學(xué)本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))開(kāi)題報(bào)告
學(xué)院:材料科學(xué)與工程學(xué)院             專業(yè)班級(jí):2008級(jí)高分子材料與工程2班

課題名稱 葉酸偶聯(lián)HTCC的合成及其基因載體初步研究

1、本課題的的研究目的和意義:
殼聚糖是天然存在的陽(yáng)離子多糖,具有無(wú)毒、生物相容性好和可生物降解性等特點(diǎn)。季銨化殼聚糖是一種可溶性的殼聚糖衍生物,季銨基團(tuán)的引入可明顯增加殼聚糖的溶解性。葉酸可與腫瘤細(xì)胞表面大量表達(dá)的葉酸受體特異性地結(jié)合,將葉酸接枝于殼聚糖上可增加產(chǎn)物的靶向性。通過(guò)本課題的研究以期獲得一種具有潛在研究和應(yīng)用價(jià)值的新型殼聚糖基非病毒基因載體。
2、文獻(xiàn)綜述(國(guó)內(nèi)外研究情況及其發(fā)展):
殼聚糖作為一種具有天然優(yōu)良性能的生物材料,可廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、環(huán)保、化工等領(lǐng)域。特別是近年來(lái),隨著高分子科學(xué)和生物醫(yī)學(xué)工程的發(fā)展,殼聚糖在醫(yī)學(xué)方面的研究和應(yīng)用日益增多,已被視為人體的“第六生命要素”。 追溯到1995年,Mislick等[1]制備了葉酸-聚賴氨酸/DNA復(fù)合物作為溶菌酶基
……(新文秘網(wǎng)http://www.120pk.cn省略705字,正式會(huì)員可完整閱讀)…… 
N-季銨化殼聚糖與DNA復(fù)合,并對(duì)復(fù)合物進(jìn)行表征測(cè)試,來(lái)初步研究對(duì)葉酸偶聯(lián)N-季銨化殼聚糖作為基因載體的優(yōu)越性。
成果形式:
(1) 制備目標(biāo)產(chǎn)物葉酸偶聯(lián)N-(2-羥丙基)-3-甲基氯化銨殼聚糖(FA-HTCC)。
(2) 通過(guò)水溶性試驗(yàn)測(cè)定HTCC和FA-HTCC的水溶性;通過(guò)溶解性試驗(yàn)測(cè)定產(chǎn)物的溶解性。用紅外和核磁等手段對(duì)其進(jìn)行表征,通過(guò)對(duì)合成條件的優(yōu)化,在較優(yōu)條件下合成HTCC,F(xiàn)A-HTCC并對(duì)其水溶性進(jìn)行分析及檢測(cè)其作為基因載體的優(yōu)越性。
(3)分析不同N/P的FA-HTCC/DNA復(fù)合物的粒徑與Zeta電位。檢測(cè)葉酸偶聯(lián)殼聚糖納米;蛑委熭d體的優(yōu)劣。
4、 擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題:
(1)該實(shí)驗(yàn)反應(yīng)時(shí)間較長(zhǎng),注意控制反應(yīng)時(shí)間,防止反應(yīng)過(guò)短或過(guò)長(zhǎng)影響產(chǎn)物的取代度。
(2)在制備FA-HTCC的過(guò)程中如何能夠更好地在N2保護(hù)下避光反應(yīng)。
(3)在制備不同N/P的FA-HTCC/DNA復(fù)合物的粒徑時(shí)注意控制質(zhì)粒DNA的提取及如何控制復(fù)合物的濃度配比。
5、研究思路、方法和步驟:
研究思路:
制備目標(biāo)產(chǎn)物FA-HTCC,用紅外和核磁等手段對(duì)目標(biāo)產(chǎn)物進(jìn)行表征,檢測(cè)產(chǎn)物的水溶性、溶解性,最后通過(guò)顯微鏡定性觀察,比較葉酸偶聯(lián)殼聚糖納米粒作為基因治療載體的優(yōu)劣。
方法:
通過(guò)季銨化改性得到HTCC,再通過(guò)接枝作用制得FA-HTCC。對(duì)HTCC和FA-HTCC進(jìn)行表征分析。然后制備葉酸偶聯(lián)N-季銨化殼聚糖與DNA復(fù)合物,比較葉酸偶聯(lián)殼聚糖納米粒和殼聚糖納米粒作為基因治療載體的優(yōu)劣。
步驟:
(1) 在酸性條件下,以2,3-環(huán)氧丙基三甲基氯化銨(ETA)和殼聚糖為原料,合成出具有良好水溶性、帶有正電荷殼聚糖衍生物HTCC。然后以HTCC為原料接枝葉酸基團(tuán),得到葉酸偶聯(lián)N-(2-羥丙基)-3-甲基氯化銨殼聚糖(FA-HTCC)。并對(duì)HTCC和FA-HTCC進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征分析。
(2) 通過(guò)將葉酸偶聯(lián)N-季銨化殼聚糖與DNA復(fù)合,并對(duì)復(fù)合物進(jìn)行表征測(cè)試。通過(guò)粒徑與Zeta電位的測(cè)定、原子力顯微鏡觀察比較不同N/P的FA-HTCC/DNA復(fù)合物的粒徑,來(lái)初步研究對(duì)葉酸偶聯(lián)N-季銨化殼聚糖作為基因載體的優(yōu)越性。
6、本課題的進(jìn)度安排:
(1) 2012年2月--12年4月:
葉酸偶聯(lián)N-季銨化殼聚糖的合成
(2) 2011年4月--12年5月:
樣品表征,及作為基因載體優(yōu)劣性能的初步研究
(3) 2012年5月--12年6月:
整理和補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),撰寫實(shí)驗(yàn)論文,制作PPT,準(zhǔn)備答辯
7、參考文獻(xiàn):
[1] Mislick K A., Baldeschwieler J D., Kayyem J F., et al. Transfection folate-polylysine DNA comple*es: evidence for lysosomal delivery[J]. Bioconjugate Chemistry, 1995, 6 (5): 512-515.
[2] Lee R J, Huang L. Folate-targeted anionic liposome-entrapped polylysine- condensed DNA for tumor cell-specific gene transfer[J]. Journal of Biological Chemistry, 1996, 271: 8481-8487.
[3] Lee R J, Huang L. Lipidic vector systems for gene tran ……(未完,全文共3920字,當(dāng)前僅顯示1980字,請(qǐng)閱讀下面提示信息。收藏《論文開(kāi)題:葉酸偶聯(lián)HTCC的合成及其基因載體初步研究》
文章搜索
相關(guān)文章