論文開(kāi)題：厚樸酚和和厚樸酚的分離及結(jié)構(gòu)修飾

大學(xué)本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))開(kāi)題報(bào)告
學(xué)院：化工學(xué)院　　　　　　　　　　　　　專業(yè)班級(jí)：09制藥工程1班　　

課題名稱 厚樸酚和和厚樸酚的分離及結(jié)構(gòu)修飾

1、本課題的的研究目的和意義：
本實(shí)驗(yàn)是厚樸酚及和厚樸酚衍生物抗抑郁活性的前期化學(xué)研究，研究快速拆分厚樸酚和和厚樸酚的方法，目的是將厚樸酚和和厚樸酚混合物分離，針對(duì)二者分子中的羥基官能團(tuán)進(jìn)行甲基化和�；Y(jié)構(gòu)修飾，并以光譜學(xué)方法檢測(cè)反映產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)。
本實(shí)驗(yàn)意義主要有兩點(diǎn)：一是分離方法采用C-18色譜柱，可以循環(huán)利用，環(huán)保；二是本實(shí)驗(yàn)所用的流動(dòng)相為甲醇-水，并不涉及很多有機(jī)溶劑，毒性小。


2、 文獻(xiàn)綜述（國(guó)內(nèi)外研究情況及其發(fā)展）：
厚樸酚與和厚樸酚是我國(guó)傳統(tǒng)中藥厚樸中的兩個(gè)主要活性成分，具有抗菌、抗炎、抗腫瘤、肌肉松弛、降膽固醇和抗衰老、抗抑郁、抗焦慮等廣泛藥理作用 [1]。
研究表明，和厚樸酚對(duì)金黃色葡萄球菌、鏈球菌、大腸桿菌有抑制作用[2]。和厚樸酚還具有十分顯著地抗生齲齒菌的作用[3]。和厚樸酚還具有明顯的抗真菌作用，其對(duì)新生隱球菌、白色念珠菌的最小滅菌濃度為25~100mg/L[4]。此外，Amblard等[5]的研究表明，和厚樸酚還具有明顯的抗病毒作用。和厚樸酚是通過(guò)抑制細(xì)胞內(nèi)PI3K/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路介導(dǎo)對(duì)單核/巨噬細(xì)胞（U937/RAW264.7細(xì)胞）、淋巴細(xì)胞（脾臟淋巴細(xì)胞及CTLL-2細(xì)胞）抗炎作用
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有學(xué)者采用硅膠層析分離技術(shù)和重結(jié)晶的方法對(duì)厚樸酚及和厚樸酚的混合物進(jìn)行分離、純化，得到了高純度的厚樸酚及和厚樸酚單體[18]。后又有學(xué)者采用硅膠柱層析法分離純化厚樸中的厚樸酚與和厚樸酚，采用不同系統(tǒng)的洗脫液進(jìn)行洗脫，以厚樸酚的純度為考察指標(biāo)，篩選最佳洗脫系統(tǒng)，得到結(jié)論是石油醚：丙酮的洗脫效果最佳[19]。
一般來(lái)說(shuō)，生物樣本中厚樸酚與和厚樸酚濃度低，組成復(fù)雜，因此，建立一種準(zhǔn)確、靈敏、重現(xiàn)性好的分析方法對(duì)于其藥代動(dòng)力學(xué)研究非常重要。目前，厚樸酚與和厚樸酚的主要檢測(cè)方法有電化學(xué)法[20]、色譜法（[21]-[23]）和光譜法（[24]、[25]）。
我國(guó)藥典把薄層和高效液相色譜方法檢測(cè)厚樸酚與和厚樸酚作為厚樸藥材質(zhì)量的控制標(biāo)準(zhǔn)[26]。但色譜法通常需要較長(zhǎng)的分離分析時(shí)間，與之相比，光譜法具有快速的特點(diǎn)。厚樸酚與和厚樸酚是同分異構(gòu)體，分子內(nèi)均含有兩個(gè)酚羥基，但二者光酸性不同[27]，這為用熒光法（FL）同時(shí)測(cè)定提供了基礎(chǔ)。于是利用厚樸酚與和厚樸酚的光酸性的不同，建立同時(shí)檢測(cè)厚樸藥材中這兩種主要成分的熒光方法。通過(guò)對(duì)樣品的測(cè)定發(fā)現(xiàn)，與色譜方法一樣，甲醇提取液不需要進(jìn)一步純化處理，可以直接用于論文建立的熒光法對(duì)厚樸酚與和厚樸酚的測(cè)定。通過(guò)與HPLC方法的對(duì)照，證明熒光光譜法的精確度和準(zhǔn)確度皆能滿足分析要求。
也有學(xué)者建立了一種用高效液相色譜（HPLC）熒光檢測(cè)法同時(shí)測(cè)定中成藥中厚樸酚與和厚樸酚含量的新方法[28]。該方法靈敏度高、選擇性好、簡(jiǎn)便、易重復(fù)，為香砂養(yǎng)胃丸、藿香正氣軟膠囊、國(guó)公酒中厚樸酚與和厚樸酚的測(cè)定提供了有效的方法。
由于毛細(xì)管電泳具有高分辨率、高靈敏度、快速、低耗樣量、低污染的特點(diǎn)，毛細(xì)管電泳安培檢測(cè)（CE-AD）克服了傳統(tǒng)紫外檢測(cè)靈敏度低的缺點(diǎn)，對(duì)分離電活性物質(zhì)具有靈敏度高，選擇性好、線性范圍寬、設(shè)備簡(jiǎn)單、成本較低的特點(diǎn)。所以此方法具有很好的應(yīng)用前景。因此進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究擬拓展用于同時(shí)檢測(cè)厚樸酚與和厚樸酚的毛細(xì)管電泳安培檢測(cè)方法。并用于市售中藥厚樸，中成藥藿香正氣水和保濟(jì)丸中厚樸酚與和厚樸酚的分離檢測(cè)，結(jié)果令人滿意[29]。
此外，使用ph=8.93的KH2PO4-NaOH緩沖液（0.025mol/L），根據(jù)混合物含量測(cè)定的原理，在289.4nm和316.4nm處測(cè)定溶液吸光度來(lái)測(cè)定厚樸酚和和厚樸酚的含量，在517nm處考察厚樸酚與和厚樸酚清除DPPH•的活性，建立了同時(shí)測(cè)定厚樸酚與和厚樸酚含量的紫外分光光度法，初步考察了二者的_基清除活性。DPPH•可作為二者抗氧化活性的研究方法[30]。


3、 本課題的主要研究?jī)?nèi)容（提綱）和成果形式：
本課題主要研究如何用盡可能簡(jiǎn)潔環(huán)保的方法分離厚樸酚和和厚樸酚，如何對(duì)厚樸酚和和厚樸酚進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，以及對(duì)其結(jié)構(gòu)修飾后是否還有抗抑郁作用。
成果形式：純凈的厚樸酚，純凈的和厚樸酚，甲基化的厚樸酚，�；暮駱惴�，甲基化的和厚樸酚，酰基化的和厚樸酚。


4、擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題：
厚樸酚與和厚樸分為同分異構(gòu)體，它們是厚樸中活性最強(qiáng)的物質(zhì)，而且二者藥理活性也非常相似，因此二者較難分離。前人學(xué)者已經(jīng)采用一些方法將二者分離純化，但所用有機(jī)溶劑較多，所用材料也不能重復(fù)利用。所以本實(shí)驗(yàn)采用可循環(huán)的C-18色譜柱分離，用甲醇：水系統(tǒng)做洗脫液，較經(jīng)濟(jì)環(huán)保。
5、研究思路、方法和步驟：
思路：厚樸酚與和厚樸分為同分異構(gòu)體，它們是厚樸中活性最強(qiáng)的物質(zhì)，而且二者藥理活性也非常相似，因此二者較難分離。前人學(xué)者已經(jīng)采用一些方法將二者分離純化，但所用有機(jī)溶劑較多，所用材料也不能重復(fù)利用。所以本實(shí)驗(yàn)采用可循環(huán)的C-18色譜柱分離，用甲醇：水系統(tǒng)做洗脫液，較經(jīng)濟(jì)環(huán)保。另外，厚樸酚與和厚樸酚都有抗抑郁作用，那么如果將其結(jié)構(gòu)修飾，是否仍然有抗抑郁作用甚至效果更好呢？于是展開(kāi)了實(shí)驗(yàn)。
方法：采用C-18色譜柱，用甲醇：水系統(tǒng)為洗脫液，將厚樸酚和和厚樸酚混合物進(jìn)行分離，得到二者的純凈物單體。然后分別對(duì)厚樸酚和和厚樸酚進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，得到甲基化物和�；�。
步驟：（1）摸索條件，先用稱取少量混合物，采用不同比例不同系統(tǒng)的洗脫液，找到最佳比例的最佳洗脫液。（2）分離純化，采用效果最佳的洗脫液對(duì)混合物進(jìn)行分離并純化。（3）對(duì)厚樸酚單體進(jìn)行甲基化和�；�。（4）對(duì)和厚樸酚單體進(jìn)行甲基化和�；�


6、本課題的進(jìn)度安排：
（1）9月20日-9月30日 摸索條件，先用稱取少量混合物，采用不同比例不同系統(tǒng)的洗脫液，找到最佳比例的最佳洗脫液。
（2）10月10日-11月10日 分離純化，采用效果最佳的洗脫液對(duì)混合物進(jìn)行分離并純化。
（3）11月11日-11月15日 對(duì)厚樸酚單體進(jìn)行甲基化和�；�。
（4）11月15日-11月20日 對(duì)和厚樸酚單體進(jìn)行甲基化和酰基化。




7、參考文獻(xiàn)：
[1] 王立青，江榮高，陳蕙芳.中草藥,第36卷第10期
[2] 林桂云，謝生發(fā)，謝 ……（未完，全文共7746字，當(dāng)前僅顯示2720字，請(qǐng)閱讀下面提示信息。收藏《論文開(kāi)題：厚樸酚和和厚樸酚的分離及結(jié)構(gòu)修飾》）